
Real-time Cell Binding Assays
LigandTracer Green
Cos'è LigandTracer?
LigandTracer è una tecnologia che consente di monitorare il legame di composti con cellule vive, osservandone le interazioni in condizioni fisiologiche. In questo modo, è possibile ricavare informazioni sulle dinamiche degli eventi di legame in tempo reale, il che è fondamentale per comprendere i meccanismi d'azione dei composti di interesse.
Cosa ha da offrire RT-CBA?
LigandTracer può fornire informazioni su:
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Le costanti cinetiche di legame dell'interazione (come la velocità di dissociazione spesso si correla con la durata dell'effetto di un ligando).
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Specificità e proprietà competitive. Esegui studi comparativi con linee cellulari positive e negative all'interno della stessa misurazione o studia la self-competizione pre-incubando con un ligando non etichettato.
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Studia legami complessi, dimerizzazione e processi di clustering. Misurare le interazioni su cellule vive ti avvicina a condizioni in vivo. I target possono essere espressi naturalmente nella membrana cellulare, a livelli fisiologici, in presenza di molecole e processi cellulari che possono influenzare il legame.
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Approfondimenti sui processi fisiologici (ad es. Internalizzazione). Indaga come la forza e la cinetica della tua interazione siano influenzate dalla temperatura. Riduci la temperatura per disattivare processi cellulari come l'internalizzazione, oppure aumentala a 37 °C per avvicinarti a un contesto in vivo.
Perché studi di cinetica in tempo reale su cellule?
Lo studio della dinamica delle interazioni in tempo reale fornisce una rappresentazione più accurata dei processi biologici coinvolti, rispetto a misurazioni statiche ottenute da fixed cells (per es. in formaldeide) o proteine isolate. Introducendo la cinetica di legame in cellule vive è possibile correlare dati di cinetica a risultati funzionali, come risposte di signaling, rendendo essenziale lo studio di interazioni in nativo.
LigandTracer aiuta a riconciliare discrepanze tra diversi metodi, come flow cytometry e titolazioni all'equilibrio, fornendo informazioni più dettagliate su come il ligando interagisce con i recettori in tempo reale.​
Dalle piccole molecole alle interazioni cellula-cellula.
Il ligando è definito come il partner di legame in soluzione. Il ligando più comune è una proteina, ma qualsiasi cosa, da un piccolo composto sintetico a una cellula, può essere utilizzata purché possa essere marcata con un fluoroforo.
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Più di 200 pubblicazioni hanno riportato l'uso di LigandTracer per studiare interazioni con diversi tipi di ligandi:
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Piccole molecole
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Peptidi
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Anticorpi
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Virus
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Batteri
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Cellule